校準(zhǔn)紫外分光光度計(jì)的波長是確保其測(cè)量準(zhǔn)確性的重要步驟。以下是對(duì)波長校準(zhǔn)的詳細(xì)步驟:
一、準(zhǔn)備階段
1、選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):常用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有鈥玻璃和氧化釹濾光片等。這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)具有已知的吸收峰,可用于波長校準(zhǔn)。
2、檢查儀器狀態(tài):確保光度計(jì)處于良好的工作狀態(tài),包括光源燈的使用壽命、光學(xué)元件的清潔度以及儀器的穩(wěn)定性等。
3、預(yù)熱儀器:打開電源開關(guān),預(yù)熱儀器至少20分鐘,使儀器達(dá)到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。
二、校準(zhǔn)步驟
1、設(shè)置儀器參數(shù):將光度計(jì)設(shè)置為待測(cè)狀態(tài),選擇合適的光源(如鎢燈或氘燈),并設(shè)置適當(dāng)?shù)膾呙杷俣群酮M縫寬度。
2、測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):將選擇的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(如鈥玻璃)放入樣品室,關(guān)閉樣品室蓋。使用數(shù)字鍵輸入所需的波長范圍(如190-1100nm),并開始測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸收光譜。
3、調(diào)整波長:觀察測(cè)量得到的吸收光譜,與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的已知吸收峰進(jìn)行比較。如果測(cè)量值與標(biāo)準(zhǔn)值存在偏差,需要調(diào)整儀器的波長設(shè)置,直到測(cè)量值與標(biāo)準(zhǔn)值一致。
4、記錄數(shù)據(jù):記錄校準(zhǔn)后的波長值和相應(yīng)的吸光度值,以便后續(xù)參考和使用。
三、注意事項(xiàng)
1、避免污染:在測(cè)量過程中,應(yīng)避免標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)受到污染或損壞,以免影響校準(zhǔn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2、定期校準(zhǔn):建議定期對(duì)紫外分光光度計(jì)進(jìn)行波長校準(zhǔn),以確保其測(cè)量準(zhǔn)確性。校準(zhǔn)頻率可根據(jù)儀器的使用情況和維護(hù)要求來確定。
3、專業(yè)操作:波長校準(zhǔn)是一項(xiàng)專業(yè)性較強(qiáng)的工作,應(yīng)由經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)人員來執(zhí)行。非專業(yè)人員在進(jìn)行校準(zhǔn)時(shí)可能會(huì)遇到困難或?qū)е滦?zhǔn)失敗。
通過選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、檢查儀器狀態(tài)、預(yù)熱儀器、測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、調(diào)整波長和記錄數(shù)據(jù)等步驟,可以對(duì)紫外分光光度計(jì)進(jìn)行準(zhǔn)確的波長校準(zhǔn)。同時(shí),需要注意避免污染、定期校準(zhǔn)和專業(yè)操作等事項(xiàng),以確保校準(zhǔn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。